与单链模板（如以双链作模板，要作变性处理）结合的引物，在DNA聚合酶作用下从5’端向3’端进行延伸反应，32P随着引物延长掺入到新合成链中。当ddNTP掺入时，由于它在3’位置没有羟基，故不与下一个dNTP结合，从而使链延伸终止。ddNTP在不同位置掺入，因而产生一系列不同长度的新的DNA链。

如果第一个插入的刚好是ddNTP，那么链延伸立即终止，前面的已经终止了，后面的也转录不了了。我可以这么理解：因为在延伸过程中，有dNTP，也有ddNTP，它们是随机结合到模板上的，如果结合的是dNTP，那么可以继续延伸，如果是ddNTP，停止延伸，这样就可以得到一系列不同长度的DNA。可这堆不同长度的DNA中，一定会有一系列仅仅相差一个碱基长度的DNA片段么？这概率会不会有点小哈？