霍乱的确定诊断依据主要包括以下几个方面：

1. 临床症状：霍乱的典型症状是急性水样腹泻，可能伴有呕吐，导致迅速的脱水和电解质紊乱。严重病例可能出现“米泔水样”大便，伴有肌肉痉挛、极度口渴、皮肤干燥和眼窝凹陷等脱水症状。

2. 流行病学史：患者近期有霍乱流行区居住或旅行史，或者有与霍乱患者接触的历史。

3. 实验室检查：
- 粪便直接镜检：虽然霍乱弧菌在显微镜下不易观察，但有时可以通过染色或暗视野显微镜观察到活动的弧菌。
- 粪便培养：通过在选择性培养基上培养粪便样本，可以分离出霍乱弧菌。这是确诊霍乱的金标准。
- 快速诊断试验：如PCR检测、抗原检测等，可以快速检测霍乱弧菌的存在。

4. 血清学检测：通过检测患者血清中的特异性抗体，可以辅助诊断。

5. 分子生物学检测：如PCR技术可以直接检测粪便样本中的霍乱弧菌DNA，具有高度的敏感性和特异性。

综上所述，霍乱的确定诊断需要结合临床症状、流行病学史和实验室检查结果。粪便培养是确诊霍乱的关键，而快速诊断试验和分子生物学检测可以提供快速和准确的诊断依据。