1. 病毒分离。经细胞培养分离病毒，需要生物安全二级（BSL-2)实验室及必要的仪器设备，在标本运输过程中保持低温（冷冻或冷藏）对于病毒分离非常重要。将标本接种于蚊源细胞（C6/36）或哺乳动物细胞（BHK21、Vero）进行分离培养，出现病变以后，用检测抗原或核酸的方法鉴定病毒。分离到登革病毒可以确诊，但其耗时长，需要数天，不适于快速诊断。 

　　2. 核酸检测。多种逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法可用于登革病毒核酸检测，包括一步法RT-PCR、实时荧光RT-PCR或套式RT-PCR等方法等。核酸检测可在1～2天内鉴别病毒RNA。在病人标本中检出病毒核酸，可确诊且能分型，可用于早期诊断，但核酸检测容易因污染而产生假阳性，因此要求严格分区操作。阴性结果不能排除登革热诊断，需采集第二份标本（发病5天后）开展血清学检测，进行确诊。  

　　3. 抗原检测。NS1抗原检测可采用ELISA方法或快速检测试剂，可在几十分钟到数小时完成检测，适于现场使用，是登革热急性期诊断的重要手段，在发病后1天即可检出，也有报道在发病后18天仍可在血标本中检出。目前该方法尚不能分型。由于NS1抗原检测方法的特异性，也可用于黄病毒感染的鉴别诊断。基于我国登革热流行的特点，国家卫生计生委颁发的《登革热诊疗指南（2014年第2版）》将标本中检出NS1抗原作为确诊病毒感染依据，可用于早期诊断。阴性结果不能排除登革热诊断，需采集第二份标本（发病5天后）开展血清学检测，进行确诊。 

　　4. IgM抗体检测。用于IgM抗体检测的捕获法ELISA（MAC-ELISA）是最常用的检测方法，也有多种商业化快检试剂可用于IgM抗体检测，均不能用于血清分型检测。目前检测试剂主要是检测病毒包膜蛋白特异性抗体，主要缺陷为与其他黄病毒存在交叉反应。标本中IgM抗体阳性，提示患者可能新近感染登革病毒，适用于登革热早期诊断，但单份标本不能确诊。一些登革病毒再次感染者，血标本中IgM抗体滴度底，甚至不能检出，影响IgM抗体诊断精确性。 

　　5. IgG抗体检测。可采用ELISA、免疫荧光（IFA）、免疫层析等方法检测。登革病毒IgG抗体与其他黄病毒有交叉反应。IgG抗体检测可以用来鉴定首次感染和再次感染，如果急性期标本IgG抗体阴性，恢复期阳转，则可确定为首次感染；如果患者恢复期血标本IgG抗体滴度较急性期(两份标本间隔应不少于7天）呈4倍及以上升高可认为是再次感染。采集第二份标本进行确诊对于登革热防控具有重要意义，尤其是非流行区。 

　　6. 中和抗体检测。空斑减少中和实验（Plaque Reduction and Neutralization Test，PRNT）和微量中和实验可用来检测血清中的中和抗体，是最特异的血清学检测方法，可以分型。需要生物安全二级（BSL-2)实验室及必要的仪器设备，耗时长，需要数天，不适于快速诊断。患者恢复期血清中和抗体阳转或滴度较急性期呈4倍及以上升高可以确诊。